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原核表达平台

    原核表达是将目的基因插入合适载体后,导入大肠杆菌诱导表达目的蛋白的一种技术。其优点在于大肠杆菌生长速度快、操作容易、成本低并可高密度培养。尤其是,宿主菌的遗传背景清楚,可根据不同目的对其进行改造,并有多种表达载体与之相容,因此已成为重组蛋白表达的一种重要系统。
    我们的表达团队在基因密码子优化、表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取等方面具有丰富的经验,实现了多种动物疫病蛋白在原核表达系统中高通量、高纯度、高稳定性的表达,减少了核心原料的批间差异性和杂蛋白对检测结果的影响,提高了检测的稳定性和特异性。

真核表达平台

    杆状病毒表达系统(Baculovirus Expression System, BEVS)是一种高效的真核细胞表达系统,是将目的基因通过转座子重组到杆状病毒表达载体中,转染昆虫细胞,并在昆虫细胞中大量扩增和表达重组蛋白。与原核表达系统相比,其具有真核生物蛋白质翻译后修饰所必需的酶系统,能有效进行蛋白质的翻译后加工,如转运、分泌、糖基化、脂酰化,因此表达产物的抗原性、酶活力等生物学活性与天然蛋白十分接近,特别适合于蛋白结构和功能的研究。
    我们采用该系统表达获得了多种重组蛋白,其在结构和功能上接近天然蛋白。利用其开发的检测试剂盒,特别适合用于检测具有构象表位的抗原所产生的抗体。

抗体制备和修饰平台

    抗体是诊断试剂的核心原料,对检测试剂的敏感性和特异性有重要影响。我公司的抗体制备和修饰平台既可制备单克隆抗体,也可制备多克隆抗体;还可进行后续的HRP、AP、胶体金、生物素-亲和素等的修饰与标记,保证了诊断试剂的优质核心原料的供应,也便于开发不同方法的检测试剂盒。

蛋白纯化平台

    蛋白纯化主要是将目的蛋白从大肠杆菌、昆虫细胞和病毒宿主细胞中特异性的纯化出来,减少其他杂蛋白的干扰。本公司采用GE Healthcare AKTA 色谱系统,配置凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水作用、亲和层析等分离方法,实现了自动纯化、在线监控、大批量生产等。同时依托公司技术人员丰富的纯化经验,利用不同的分离方法组合,将目的蛋白或抗体纯度提高到70%以上,保证了诊断试剂原料的质量。

胶体金免疫层析技术

    1971年Faulkd和Taytor将胶体金引入免疫化学。此后免疫胶体金技术作为一种新型免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。其优点是快速、简单、特异、灵敏、直观和成本低等,近年来逐渐应用于医学、兽医学及食品安全等领域。胶体金试纸条基本由样品垫、胶体金垫、NC膜(硝酸纤维素膜)、吸水纸以及PVC底板构成。

ELISA检测技术

    酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)是以物理方法将抗体或抗原吸附在固体载体上,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面上进行,最后通过显色反应来检测抗原或抗体的方法。ELISA试验是目前应用最广泛的一种免疫测定方法。与其他血清学方法相比,ELISA方法敏感性好、特异性强、操作简便、重复性好,抗原用量少,特别适合于各级防疫部门进行血清学诊断和流行病学普查。

PCR检测技术

    聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR),又称为体外基因扩增技术,是上世纪80年代中期由Mullis发明的一种新分子生物学技术,PCR与传统的检测方法如生物化学、细菌学、病毒学和血清学方法等相比较,PCR方法具有特异强、敏高、操作简便、快速高效等特点。在病原方面,它既可作病原体的检测,也可同时进行不同病原或同一病原不同株的鉴别,适合难以培养的病毒和细菌的检测。随着PCR技术的研究和应用的深化,在兽医学中的应用也逐渐拓宽。世界动物卫生组织(World Organisation for Animal Health, OIE)也推荐应用PCR技术来检测动物疾病。

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