一 为什么要进行猪群免疫抗体检测?
答:在畜牧业生产中,为减少猪病的发生和流行,除加强猪场的隔离消毒,减少环境中的病毒,还必须指定合理的免疫程序,使得猪体内长期保持抵抗猪病强毒攻击的有效抗体,而要了解猪体内的有效抗体水平,就必须开展猪病免疫抗体水平监测。目前国内对猪病抗体水平检测方法很多,如ELISA检测法、DOT-ELISA检测法和间接血凝法等。虽然这些检测方法具有微量、特异的优点,但需要条件较好、设备齐全的实验室,对操作人员要求专业性高,而且检测程序繁琐,一次检测至少需要6 个小时。不适合于缺少仪器设备和专门技术人员的基层兽医站、中小型养猪场的使用,直接影响了猪病的有效及时控制。
二 目前在猪病免疫抗体检测方面有什么新手段?
答:近年来,随着胶体金免疫层析技术及生化制备技术的发展,在人医上用胶体金免疫层析法检测血清中各种抗体已成为现实。目前,“猪病(猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病毒、猪口蹄疫病毒、圆环病毒)抗体免疫金标快速检测卡”就可以在很短的时间内检测出猪只接种猪病(如猪瘟)疫苗后,猪体是否产生有效抗体、为当前最新检测手段。由于该方法操作简便,不需要任何仪器设备及复杂的样品处理,检测一个样品只需15-20min,结果显示直观,重复性好,容易判定,因此,非常适应基层兽医站、兽医门诊和各养猪场开展疫病的监测及区域性疫病普查。
三 如何正确使用猪病抗体免疫金标检测卡?
答:猪病(如猪瘟)抗体免疫金标检测卡由加样区和检测区组成,在加样区内,加入3-5 滴(50—100μl)血液或血清样品,把试纸板平放于桌面上,在室温下静置20min: 便可观察结果。同时,与试剂盒配套的抗体滴度对照卡比较,确认相当于传统的血凝滴度,从而判断抗体保护力水平。可能的结果如下:
结果1 当检测区内(T)出现一条颜色较深的紫红色线,经与对照卡对比,确定相当于血凝滴度的5log2以上,说明猪病(如猪瘟)抗体滴度较高,不需要及时接种猪病(如猪瘟)疫苗;
结果2 如果在检测区(T)线区出现一条颜色很浅的紫红色线,经与对照卡对比,确定相当于血凝滴度的4log2以下,说明猪病(如猪瘟)抗体水平较低不足于抵抗野毒攻击,这是接种猪病疫苗的最佳时间;
结果3 当检测区(T)线无紫红色线出现,说明猪病(如猪瘟)抗体低于最低保护滴度。这时应当观察猪群健康状况,如果猪群健康时,应当立即进行疫苗接种;如果猪群中已经有个别猪只出现疑似猪病(如猪瘟)时,则可以作为猪病(如猪瘟)诊断的一个依据。
结果4 当检测区内(T)出现一条颜色极深的紫红色线,经与对照卡对比,确定相当于血凝滴度的10log2以上。这说明猪病(如猪瘟)抗体滴度极高,提示野毒感染的可能性,要尽快综合临床症状及实验室结果进行诊断并隔离猪只观察,同时做好防范。
结果5 当抽检的样本,大多数抗体滴度较低,仅有少数样本抗体滴度很高,也提示有野毒感染的可能,必须进一步明确诊断并迅速采取相应措施。
四 猪病抗体免疫金标检测卡的主要用途有哪些?
答:鉴于猪病(如猪瘟)抗体免疫金标试卡具有简便、准确、快速和容易判定的特点,就能为一些基层兽医站和养猪场检测猪病(如猪瘟)抗体提供有效手段。利用金标测试卡可以用于以下几个方面:
1. 了解猪群的抗体保护力以指导疫苗接种并监测免疫效果
可以按5-10%抽样检测猪群抗体水平,如果普遍低于保护力水平,应当安排疫苗接种。接种15天后,可以测定免疫后抗体水平,观察免疫效果情况,确定下一步免疫剂量与流程。常见猪病的保护力参考滴度为:猪瘟 4log2以上;口蹄疫 5log2 以上;伪狂犬病 5log2以上;蓝耳病 5log2以上。
2. 用于检验疫苗的质量和确定免疫的最适剂量
如养猪专业户或大型养猪场购买大批量的疫苗放在自己场里的冰箱冻结层内,每次最好购买同一批号(一般以生产日期定批号)的疫苗。可以从中取出一瓶疫苗,选择不同日龄的乳猪,小猪,种猪若干头,分别应用2头份,3头份,4头份,5头份疫苗进行免疫接种,免疫15天后采血,用抗体免疫金标检测卡测定抗体滴度,如果各组都能产生抵制猪病强毒攻击的免疫抗体时,则可以从中选择免疫头份少,抗体滴度高作为本批号疫苗最佳免疫剂量。如果检测的抗体达不到强毒攻击的最低保护抗体时,则应当检查是否是疫苗本身问题,还是猪群存在有免疫抑制病毒(如园环病毒)等的干扰。这时可以采取更换该厂家不同批号的疫苗或另选厂家的疫苗,再按上述方法进行不同剂量免疫,来确定是否是该批疫苗失效或是免疫抑制病毒的干扰,判定适宜的免疫剂量。
3. 用于在母猪分娩时母源抗体检测
当母猪分娩时,用猪瘟抗体免疫金标试检测卡检测母猪的抗体水平.检测结果:如果在试纸条上只出现一条色线(C质控线)或T线很弱,说明母猪体内的抗体滴度已低于抵抗强毒攻击的最低保护抗体,母猪应当及时进行疫苗接种,同时乳猪应当及时采用超前免疫,以免发生疾病病。如果母猪检测出现二条色线且T线较深,说明体内的抗体滴度较高,可以抵抗强毒的攻击,就不需要进行超前免疫,因为母猪可以通过初乳把抗体垂直带给仔猪。这时仔猪可以按照正常的免疫程序进行预防注射。
4. 用于未知免疫背景的猪群检测
当从外地,尤其是从外地区或外省购进大批量的小猪种或种猪时,饲养主自己无法了解购买的小猪是否进行过疫苗免疫或者免疫是否有效。为了防止猪瘟病发生,选择什么时间再进行猪瘟免疫最适宜时,则可以根据不同地区,不同日龄的猪只,选择有代表性的猪只采血,应用抗体免疫金标检测卡进行快速检测,通过检测结果,可以了解整个猪群抗体的状况来决定是否及时开展免疫及选择适宜的免疫剂量,这样可以大大的避免疫病的发生。
5. 用于疑似疫病出现时使用
可以采集病猪血液(血清)用金标检测卡检测,如果是发生疫病时,猪体血液中一般没有疫病抗体或抗体滴度很低。但需注意,发生疫病而耐过不死的猪只,抗体滴度可能会很高。
6. 用于疫病发病过后的免疫监测
进行疫病监测时,可应用抗体金标检测卡进行快速检测。如猪场发生疫病时,常规的处理程序是全面隔离消毒和紧急预防注射。此时猪群特别是种猪场的猪群的抗体滴度差异很大,当紧急预防注射后的抗体滴度水平又会出现明显的差异,因此,还应了解猪群抗体水平,制定合理的免疫程序尤为重要。