检测试剂

衣原体试剂

     衣原体试剂】衣原体为革兰氏阴性病原体,是一类能通过细菌滤器、在细胞内寄生、有独特发育周期的原核细胞性微生物。过去认为是病毒,现认为是介于立克次体和病毒之间的微生物。衣原体广泛寄生于人类、鸟类及哺乳动物。能引起人类疾病的有沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热肺炎衣原体。
    在自然界中分布很广泛。它有较复杂的、能进行一定代谢活动的酶系统,但不能合成带高能键的化合物必须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源,专性细胞内寄生。多呈球状、堆状, 有细胞壁,有细胞膜,属原核细胞。它是一类在真核细胞内营专性能量寄生的G-原核微生物,呈球形,直径只有0.3-0.5微米,它无运动能力,广泛寄生于人类、哺乳动物及鸟类,仅少数有致病性。具有独特的发育周期,并以二等分裂方式繁殖。
    衣原体试剂】感染症状
    一、亚急性期常合并前列腺感染:患者常出现会阴部胀痛、腰酸、双股内侧不适感或在做提肛动作时有自会阴向股内侧发散的刺痛感。
    二、生殖道感染:潜伏期为1-3周,典型的急性期症状与其他非淋病性的生殖泌尿系统感染相似,表现为尿道刺痛,不同程度的尿急及尿频、排尿刺痛,特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度红肿,分泌物稀薄,量少,为浆液性或脓性,多需用力挤压尿道才见分泌物溢出,常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口,或见污秽裤裆。
    衣原体感染的危害
    一、衣原体感染人体后,首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖,然后进入单核巨噬细胞系统的细胞内增殖。由于支原体、衣原体在细胞内繁殖,导致感染细胞死亡,同时尚能逃避宿主免疫防御功能,得到间歇性保护。支原体、衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢,溶解破坏细胞并导致溶解酶释放,代谢产物的细胞毒作用,引起变态反应和自身免疫。
    二、泌尿生殖道感染支原体后,引起的疾病男性为非淋菌性尿道炎,女性主要为非淋菌泌尿生殖道炎。男性表现为尿道刺痒、烧灼感和排尿困难,少数有尿频。尿道口轻度红肿,分泌物稀薄,部分病人无症状。
    三、当人体感染衣原体后,产生特异性的免疫,但是这种免疫力较弱,持续时间短暂,因此,支原体、衣原体感染容易造成持续,反复感染,以及隐性感染。细胞免疫方面,大部分活动性已治愈的衣原体患者,给予相应的抗原皮内注射时,常引起迟发型变态反应。这种变态反应可用淋巴细胞进行被动转移。
    衣原体试剂】培养特性
    衣原体为专性细胞内寄生。绝大多数能在6~8天龄鸡胚或鸭胚卵黄囊中生长繁殖,并可在卵黄囊膜内找到包涵体、原体和网状体颗粒。某些衣原体经一定接种途径可使小鼠感染,如鹦鹉热衣原体接种小鼠腹腔;性病淋巴肉芽肿衣原体接种小鼠脑内。
    衣原体可在某些原代或传代细胞株中生长,如HeLa-299、BHK-21、McCoy或HL细胞株,比鸡胚培养更敏感。为提高分离培养阳性率,可通过离心或用X线照射细胞,使更多的衣原体吸附到易感细胞表面。
    主要类型
    1.已知的与人类疾病有关的衣原体有三种,分别是鹦鹉热衣原体、沙眼衣原体和肺炎衣原体。这三种衣原体均可引起肺部感染。鹦鹉热衣原体可通过感染有该种衣原体的禽类,如鹦鹉、孔雀、鸡、鸭、鸽等的组织、血液和粪便,以接触和吸入的方式感染给人类。沙眼衣原体和肺炎衣原体主要在人类之间以呼吸道飞沫、母婴接触和性接触等方式传播。衣原体感染的实验室检查1.衣原体细胞培养:对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞,最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆荧光抗体染色,可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%,阳性即可确立诊断。
    2.衣原体细胞学检查法:在感染细胞内可有衣原体的包涵体存在。从感染部位采取细胞标本作涂片,姬姆萨染色包涵体是蓝色或暗紫色,碘染色显示褐色。但敏感性差(40%),已较少采用。采用荧光素标记的抗衣原体单克隆抗体,来检测细胞涂片中的衣原体,使用较为方便,主要用衣原体外膜蛋白(MOMP)的单克隆抗体的商品试剂(MicoTrak,Pathfinder,Monofluor)。结果判断:要衣原体数>10个才能判为阳性。
    按第9版Bergey's细菌性分类手册,衣原体在分类学上属于衣原体目(Chlamydiales)、下有衣原体科(Chlamydiaceae)、衣原体属(Chlamydia)。
    现依据DNA的同源性和抗原构造将衣原体份为1属4种。即衣原体属(Chlamydiae)分为:沙眼衣原体(C. trachomatis)、肺炎衣原体(C. pneumoniae)、鹦鹉热衣原体(C. psittaci)和兽类衣原体(C. pecorum)。
    对人致病的主要是前三种衣原体,其中以沙眼衣原体最多见。
    其中沙眼生物变种有A~K,其间另增亚型Ba、Da和Ia,共14个血清型;性病淋巴肉芽肿生物变种有L1、L2、L2a、L3四个血清。用单克隆抗体识别鹦鹉热衣原抗原至少可分为8个血清型。肺炎衣原体只有1个血清型。
    衣原体试剂】沙眼衣原体
    硝酸纤维素膜,并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂和原料制成,应用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法,用于女性宫颈和男性尿道中衣原体的检测。从而达到检测女性宫颈和男性尿道中衣原体的存在,临床辅助诊断衣原体感染,试验结果还需要临床医生结合患者症状、体征及其它检查结果进一步确定的目的。
    检测方法
    样本要求
    取样的质量对沙眼衣原体的检测极为重要。沙眼衣原体的检测质量有赖于准确的样品收集技术,应使样品中含有大量的细胞成分而不只是体液。
    宫颈样品:
    使用消毒宫颈拭子,或消毒的亚麻、涤纶拭子。在取样前用另外的拭子或棉球将宫颈口外区域的黏液抹去,将取样拭子插入宫颈管内通过鳞柱状上皮交界处,直到几乎拭子头已看不到。旋转拭子15-20秒钟取出,不要碰到宫颈外及阴道壁。这样能保证得到更多的柱状上皮细胞,而沙眼衣原体主要寄生在柱状上皮细胞中。
    宫颈样品也可用细胞刷(未提供)收集(注意:孕妇不可用此方法)。清洁宫颈口外后,将细胞刷插入宫颈管,通过鳞柱状上皮细胞交界处,停留2-3秒钟,旋转细胞刷两圈后取出,注意不要碰到阴道壁。
    如果检测可以即刻进行,将取样后的拭子放入样品处理管中。
    衣原体试剂】男性尿道样品:
    尿道用拭子或细胞刷(未提供)可用于尿道取样。病人在取样前至少1小时内不要小便。
    将拭子或细胞刷插入尿道2-4厘米,旋转3-5秒钟后取出。如果检测可以即刻进行,将取样后的拭子放入样品处理管中。
    检验结果
    阴性结果:仅质控线(C)有一条红线,检测线(T)无红线出现。
    阳性结果:除质控线外,另有一条红线出现在检测线(T)。
    无效结果:质控线不出现红线,则结果无效。应更换新的检测试剂盒重复实验。可用剩余的已处理的样品或重新取样。
    注意:当检测线很强时,质控线可能相对减弱,此属正常现象。
    金标法定性沙眼衣原体快速检测有着快速、方便、准确性高的优点。为临床医生的辅助诊断等节省了很多时间。为市面上沙眼衣原体快速检测的主流。
    衣原体阳性症状
    出现在约1-3周或数月后,男性衣原体阳性主要表现为尿道内不适,刺痛及烧灼感,并伴有不同程度的尿频、尿急、尿痛,尿痛较淋病为轻。尿道口轻度红肿并有浆液或粘液脓性分泌物,稀薄而量少,长时期不排尿或早晨首次排尿前可见尿道口分泌物污染内裤,并可见尿道口有“糊口”现象;分泌物少时,于晨起挤压尿道才流出少量粘液。合并膀胱炎时可有血尿;无症状性非淋菌性尿道炎,约30-40%病人症状不典型或根本无症状。约1/3左右的淋球菌尿道炎病人合并沙眼衣原体感染,淋病治愈后又出现尿道炎症状,易误诊为慢性淋病或PPNG菌株感染。衣原体阳性表现为附睾肿大,变硬及触痛,多为单侧,部分患者的抗沙眼衣原体抗体升高,可直接从附睾抽吸液中分离出沙眼衣原体;累及睾丸可出现睾丸炎,表现为睾丸疼痛、触痛、阴囊水肿及输精管变硬变粗;累及前列腺时可出现后尿道、会阴及肛门部位钝痛或触痛,可有性功能障碍,直肠镜检可触及有压痛的前列腺。如前列腺明显肿大,可压迫后尿道而出现尿流变细、排尿无力及尿流中断等;本病还可以合并Reiter综合征,即关节炎,结膜炎,尿道炎三联症。
    预防措施
    新婚夫妇在准备怀孕前应该进行衣原体检测,若存在衣原体感染,应于治愈后再怀孕;其次,妊娠早期检测,若检测为阳性,应及时治疗,以免对胎儿构成损害。未孕妇女可服用美满霉素、红霉素等药物,孕妇只限用红霉素治疗。红霉素副作用小,衣原体是一种通过性接触传播的疾病,也存在间接性感染,因此,夫妇双方重视性卫生,杜绝不洁性生活,对预防衣原体大概感染具有十分重要的意义。
    感染对策
    那么,如果在门诊检查中发现衣原体阳性,该怎么办呢?大家不妨参照以下对策,既避免无谓的恐慌和过度治疗,又能及时治疗相关疾病。
    情况一:单纯从尿道、阴道中检出衣原体,而没有任何伴随的症状。
    对策:不必理它,无须治疗。
    分析:这种“衣原体阳性”是正常的携带状态,并不意味着致病。如果医生为你进行全身的微生物培养,至少可以分离出数十种病原体,但这并不代表你有数十种疾病。这种衣原体阳性并不等于衣原体感染,衣原体可以与人共同生存而不表现出感染征象。而且,作为正常人群,即便经过药物治疗降低了其携带率,但经过一段时间的正常性行为,携带率也会恢复原有水平。因此,不要恐慌,更不要滥用药物治疗,日常的清洁保养用Ph4弱酸配方的女性护理液已足够。
    情况二:检出衣原体,同时有生殖道炎症或合并性传播疾病。
    对策:进行抗衣原体的治疗。
    分析:这种“衣原体阳性”属于感染状态,需要积极治疗。
    情况三:孕前检查发现支原体阳性。
    对策:有症状或有生育要求时,建议男女双方同时检查,衣原体阳性者应正规治疗。
    分析:衣原体检查是孕前优生五项检查之一,衣原体可以影响精子的活力,可以感染胎儿和新生儿,引起早产、死胎、低体重儿、新生儿脑膜炎等。出于优生优育的考虑,支原体阳性应治疗。正规治疗结束一周后,支原体培养阴性,可认为已治愈,可以开始准备生育。
 
 

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