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【猪瘟试剂】猪瘟病毒抗体检测试剂盒(阻断ELISA)说明书

发布时间:2017-08-10 11:05:56 来源:猪瘟试剂 浏览次数:

 

猪瘟病毒抗体检测试剂盒(阻断ELISA)说明书
【产品名称】
通用名称:猪瘟病毒抗体检测试剂盒(阻断ELISA
英文名称:Classical Swine Fever VirusCSFV Antibody Test Kit (Blocking ELISA)
【包装规格】96/盒、192/
【预期用途】本试剂盒采用阻断ELISA方法定性检测猪血清或血浆中的特异性猪瘟病毒抗体,可作为猪瘟病毒疫苗的免疫监测及该病的辅助检测。
【检测原理】如果待检样品中含有猪瘟病毒抗体,就会阻断猪瘟单克隆抗体酶标结合物与猪瘟重组抗原包被的微量反应板结合。结合在包被板上的猪瘟单克隆抗体酶标结合物与底物反应的显色状况即可反映出样品中是否含有保护水平的猪瘟病毒抗体。
【主要组成成份】
序号
名称
规格(96T/192T
序号
名称
规格(96T/192T
1
包被板
96/192
7
终止液(6号液)
15mL
2
酶标结合物(1号液)
12/22mL
8
阳性对照品
1mL
3
洗涤液10×2号液)
100mL
9
阴性对照品
1mL
4
底物液(3号液)
15mL
10
封板膜
3/6
5
显色液(4号液)
15mL
11
说明书
1
6
样品稀释液(5号液)
40mL
 
 
 
【储存条件及有效期】 2~8℃保存,防止冷冻,有效期为12个月。
【适用仪器】 450nm630nm波长酶标仪;37℃恒温设备;可调微量移液器。
【样品要求】
1.本试剂仅适用于检测猪血清或血浆。
1.为取得最佳实验效果,避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品;
1.短期(3天内)将进行检测的血清样品可存放于28℃;如需长期保存,应置于-20℃以下,避免反复冻融。
【检验方法】
1.洗涤液配制:用蒸馏水或去离子水将洗涤液10×(2号液)1:10稀释(例如,取100mL洗涤液10×,加900mL蒸馏水或去离子水混合),充分混匀即为工作浓度洗涤液。
2.加样品稀释液:每孔加样品稀释液50μL
3.加样反应:样品孔,每孔仅加入50μL待检样品;空白对照2孔,每孔仅加入50μL样品稀释液;阴性对照2孔,每孔仅加入50μL阴性对照品;阳性对照2孔,每孔仅加入50μL阳性对照品。盖好封板膜,37℃避光反应60分钟。
4.洗板:甩去孔内液体,每孔注满工作浓度洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟;最后一次甩净,拍干。
5.加酶反应:除空白对照孔外,其余每孔加酶标结合物(1号液)100μL,盖好封板膜,37℃避光反应60分钟。甩去孔内液体,如上洗板,拍干。
6.显色反应:按所需用量,临用前取等体积底物液(3号液)和显色液(4号液)充分混匀,每孔加100μL,盖好封板膜,37℃避光反应15分钟。
7.终止反应: 加终止液(6号液)50μL,以空白对照调零,用酶标仪于450nm波长(630nm作为参比波长)读取OD值。
【参考值】
阻断率(PI)的计算方法:
PI= 阴性对照平均OD值-阳性对照平均OD值/阴性对照平均OD值×100
有效性判定:
阴性对照孔OD≥0.5(若小于0.5则实验无效);
阳性对照孔PI≥35%(若小于35%则实验无效)。
【检验结果的解释】
样品PI≥35%,判为猪瘟病毒抗体阳性;
样品PI35%,判为猪瘟病毒抗体阴性。                        
【检验方法的局限性】本试剂盒仅供筛查,不作为确诊依据。
【注意事项】
1.试剂盒各组份从冷藏环境中取出时,必须平衡至室温后,方可开封启用。未使用完的试剂组份应及时放回2~8℃密封保存。
2.加试剂前应将试剂轻摇、混匀。
3.孵育时必须用封板膜密封板孔,封板膜不可以重复使用。
4.不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧,各瓶之间瓶盖不可混用。
5.用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性,须小心使用。
 
 
提示:本文件内容及相关参数如有变更,恕不另行通知。我公司保留在不另行通知的情况下,对其中所包含内容进行更改的权利。具体操作须以产品内说明书为准。
 

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